[석면분석] 위상차현미경 표본제작 > 석면자료실

대기오염물질공정시험기준 2016.11.22 개정

1. 아세톤-트리아세틴법

 

1) 아세톤 (CH3COCH3, aceton, 분자량:58.08)

-유기용매, 화학식은 CH3COCH3. 순수한 아세톤은 약간 냄새가 나며 무색의 가연성 액체로 끓는점은 56.5 ℃이다.

 

2) 트리아세틴 (글리세롤 트리아세테이트; C9H14O6, glycerol triacetate, 분자량: 218.12) 

-아세트산의 함유율이 약 62 % 이상 되는 아세테이트 섬유. 녹는점이 약 300 ℃로 다른 아세테이트 섬유보다 높다.

 

3) 래커 (lacquer) 또는 바니쉬 (nail polish)

-섬유소나 합성수지 용액에 수지, 가소제, 안료 따위를 섞은 도료. 쉽게 마르고 오래가는 특징이 있다.

 

-매니큐어액 : 별도의 언급이 없으면 시약은 유해금속 측정용 및 분석용을 사용한다.

2. 디메틸프탈레이트 - 디에틸옥살레이트법

 

1) 디메틸프탈레이트 (C6H4(COOH)2, dimethyl phthalate, 분자량: 116.14)와 디에틸옥살레이트 ((C2H5)2C2O4, diethyl oxalate, 분자량: 146.14)를 1:1로 혼합한 용액속에 새 멤브레인 필터를 0.05 g/mL의 비율로 가하여 용해시키고, (25 ∼ 50) mL 정도의 뚜껑이 있는 병에 보존한다.

 

2) 이 용액은 조제 후, 수개월 이상 지나면 투명도가 나빠지거나 또는 불순물이 보일 수 있으므로 제조 후 1 개월 이상 지난 것은 사용하지 않는 것이 좋다.

 

3) 온도가 낮을 때에는 다소 투명도가 나빠질 수도 있으므로, 약간 가온하여 사용한다.

 

1. 아세톤 - 트리아세틴법

-아세톤은 가연성 액체이므로 인화되지 않도록 주의하고, 아세톤증기는 인체에 유해하므로, 아세톤의 가열은 반드시 발화 등의 염려가 없도록 설계된 후드를 설치한 통풍실에서 하며, 드리프트 챔버 내에서 실시하는 것이 바람직하다.

 

1) 깨끗한 슬라이드글라스나 커버글라스를 준비한다.

 

2) 아세톤증기 발생장치의 플라스크에 (40 ∼ 60) mL 의 아세톤을 넣는다.

 

3) 냉각기에 냉각수를 흘린다.

 

4) 맨틀히터에 전원을 넣고, 아세톤의 비등점 (56.5 ℃)까지 서서히 가열시킨다.

 

5) 시료채취한 멤브레인필터를 2 등분하고, 포집한 면을 위로 하여 슬라이드글라스의 위에 얹는다.

6) 위상차현미경에서는 표본의 일부분을 계측하게 되므로, 멤브레인 필터의 크기에 따라 4 등분하여도 상관이 없으며, 정확하게 2 등분이나 4 등분이 되어 있지 않아도 계수치에는 영향을 미치지 않는다.

7) 여과지를 절단할 때, 찢어지거나 정전기가 발생하여 포집한 석면섬유중의 일부가 유실될 가능성이 있으므로 충분한 주의가 필요하다.

 

8) 아세톤 증기가 충분히 발생하고 있는 것을 확인한 후, 증기배출수의 마개를 열어서 5 ∼ 6 초간 방치한다.

 

9) 아세톤의 증기 배출구로부터 (15 ∼ 25) mm 떨어진 위치에서 멤브레인필터를 얹은 슬라이드 글라스를 아세톤 증기 속으로 서서히 이동시켜 멤브레인필터면에 아세톤 증기가 균일하게 접촉하도록 하면, 멤브레인필터는 (2 ∼ 5) 초 사이에 투명하게 된다. 액체상의 아세톤이 멤브레인필터면에 떨어지지 않도록 하기 위하여 주기적으로 가제 등을 사용하여 배출구를 닦아야 한다.

 

10) 가능한 빨리 마이크로 피펫을 사용하여 트리아세틴을 (3 ∼ 3.5) μL (2 ∼ 3 방울) 멤브레인 필터의 중심부에 적하하고, 그 위에 커버글라스를 덮는다.

- 커버글라스를 덮을 때에는 가능한 한 기포가 발생하지 않도록 주의하면서 서서히 멤브레인필터 위에 얹고, 핀셋으로 가볍게 누른다.

- 기포가 너무 많이 형성되거나 트리아세틴의 양이 부족하면 수분 후에 커버글라스가 떨어지게 된다.

- 커버글라스와 접촉하는 멤브레인필터의 가장자리 부분에 트리아세틴이 많이 남아 있으면, 가장자리에서 석면섬유의 이동이 일어난다.

 

11) 래커나 바니쉬 등을 사용하여 커버글라스의 가장자리를 슬라이드글라스와 접촉시킨다.

 

12) 투명화가 늦으면 슬라이드를 표면온도 50 ℃의 가열판 위에서 투명화가 될 때까지 약 15 분 동안 가열한다.

 

13) 측정장소 및 측정조건 등을 기입하여 슬라이드글라스의 가장자리에 부착한다.

 

14) 만든 표본은 표본을 넣어두는 케이스 등에 보관한다.

2. 디메틸프탈레이트 - 디에틸옥살레이트법

1) 표본을 오염시킬 염려가 없는 실내에서 먼지를 채취한 멤브레인필터를 시료 보관용 용기에서 꺼내어 2 등분한다.

 

2) 슬라이드글라스의 중심부에 디메틸프탈레이트-디에틸옥살레이트 용액을 (0.03 ∼ 0.05) mL (1 방울) 떨어뜨린다.

 

3) 그 위에 2 등분한 멤브레인필터를 포집한 면을 위로하여 조용히 얹는다.

 

4) 멤브레인필터가 약간 투명해진 다음에 커버글라스를 그 위에 얹고 핀셋으로 가볍게 누른다. 이 때 기포가 들어가지 않도록 주의한다.

 

5) 약 30 분간 방치하면 용액에 접한 부분은 완전히 투명하게 된다.

 

6) 측정장소 및 조건 등을 라벨에 기입하여 슬라이드글라스 가장자리에 부착한다.

 

7) 만든 표본은 표본을 넣어두는 케이스 등에 보관한다.