[석면분석] 위상차현미경 정의 > 석면자료실

1. 목적 

이 시험방법은 대기환경 중 석면의 농도 측정 방법을 규정함으로써 석면배출을 감시 및 억제하고자 하는데 그 목적이 있다. 대기 중 부유먼지 중의 석면섬유를 위상차현미경을 주 시험방법으로 한다.

2. 적용범위 

-이 시험방법은 대기중의 실내에 석면을 사용하고 있는 건축내 또는 일정한 공간내에 석면 함유되어 있는 건축물 폐기시 비산되는 부유먼지 중의 석면의 분석방법에 대하여 규정한다.

-위상차 현미경법 (PCM, phase contrast microscopy)을 이용한 현미경 표본은 아세톤-트리아세틴법, 디메틸프탈레이트-디에틸옥살레이트법으로 제작한다. 위상차의 검출한계는 l/10 ∼ l/1,000 λ 사이이다.

표 1. 위상차현미경법의 식별방법, 측정범위, 정량범위, 측정계수

3. 간섭물질

간섭성빛

위상차가 일정해서 간섭을 일으킬 수 있는 빛. 빛은 파장과 주기가 모두 짧아서 간섭성을 띄려면 하나의 광원에서 갈라진 두 갈래의 빛일 경우에만 가능하다.

물리적 간섭

후광 (halo)이나 차광 (shading)은 관찰을 방해하기도 한다. 초점이 정확하지 않고 콘트라스트가 역전되는 경우도 있다.

4. 용어정의

위상차 현미경 : 굴절율 또는 두께가 부분적으로 다른 무색투명한 물체의 각 부분의 투과광 사이에 생기는 위상차를 화상면에서 명암의 차로 바꾸어, 구조를 보기 쉽도록 한 현미경이다.

위상차현미경을 사용하여 섬유상으로 보이는 입자를 계수하고 같은 입자를 보통의 생물현미경으로 바꾸어 계수하여, 그 계수치들의 차를 구하면 굴절율이 거의 1.5인 섬유상의 입자 즉 석면이라고 추정할 수 있는 입자를 계수할 수가 있게 된다.

석면먼지의 농도표시는 20 ℃, 1 기압 상태의 기체 1 mL 중에 함유된 석면섬유의 개수 (개/mL)로 표시한다.

대기 중 석면은 강제 흡인 장치를 통해 여과장치에 채취한 후 위상차현미경으로 계수하여 석면 농도를 산출한다.

멤브레인필터 : 셀룰로오스 에스테르를 원료로 한 얇은 다공성의 막으로 구멍의 지름은 평균 (0.01 ∼ 10) μm의 것이 있다. 이 멤브레인필터의 특징은 입자상 물질의 포집율이 매우 높고, 특히 필터의 표면에서 먼지의 포집이 이루어지기 때문에, 포집한 입자를 광학현미경으로 계수하기에 편리하다.

5. 분석기기 및 기구

★ 위상차 현미경

1) 아세톤 증기 발생장치

 2)삼구볼플라스크 : (250 ∼ 500) mL 용량, 갈아맞춤형

3)유리관 : 수평으로부터 (20 ∼ 30)° 각도로 목이 구부러진 마개가 달린 유리관. 내경 8 mm, 길이 (16 ∼ 22) mm

4) 냉각기 : 아린씨 냉각기

5) 맨틀히터 : 하단부 열 공급장치

6) 온도계 : 일반 습식온도계

7) 코르크마개 : 실험용 코르크마개

8) 비커 : 응축한 아세톤 회수용

9) 슬라이드글라스 : 중성세제의 용액에 담가 표면에 묻은 오물을 충분히 제거한 후 물로 잘 씻고, 정제수로 충분히 세정하여 알코올에 담근 후에 깨끗한 가제로 닦아서 슬라이드 글라스의 격납상자에 넣어둔다. 슬라이드글라스나 커버글라스를 닦는 가제는 중성세제의 용액으로 끓인 후, 물로 잘 씻고 오물이 묻지 않도록 하여 건조시킨 것을 사용한다. 또는 에틸에테르와 에틸알콜을 동량으로 혼합한 에테르알콜을 렌즈 페이퍼에 소량 묻혀서 사용하여도 된다. 슬라이드 글라스의 가장자리에 측정조건 등을 기입하는 레벨을 붙여두면 좋다.

10) 커버글라스 : 크롬황산에 하루 이상 담가 두었다가 정제수로 세정하여 알코올에 담근 다음 깨끗한 가제로 닦고, 적당한 크기의 샬레에 넣어 둔다.

11) 피펫 : 용량 5 μL의 마이크로 피펫

12) 칼 또는 가위 : 시료 채취용 및 분석용 가위

13) 핀셋 : 시료 여과지용 핀셋

14) 표본보관용 케이스 : 대기 중에 노출되지 않는 시료 보관용 케이스